活性氧(reactive oxygen species , ROS)是體內(nèi)一類氧的單電子還原產(chǎn)物,，是電子在未能傳遞到末端氧化酶之前漏出呼吸鏈并消耗大約2 %的氧生成的，包括氧的一電子還原產(chǎn)物超氧陰離子(O2·-)、二電子還原產(chǎn)物過(guò)氧化氫(H2O2)、三電子還原產(chǎn)物羥基自由基(·OH)以及一氧化氮等。
    ROS 的產(chǎn)生主要是線粒體由狀態(tài)Ⅲ向狀態(tài)Ⅳ轉(zhuǎn)換中高氧的環(huán)境和高還原態(tài)的呼吸鏈?zhǔn)勾罅侩娮勇┏霾⑦€原氧分子而形成。

檢測(cè)方法
1、化學(xué)反應(yīng)法
由于活性氧具有較高的反應(yīng)活性, 它們可以與許多不同的化合物發(fā)生化學(xué)反應(yīng), 由此產(chǎn)生各種不同的反應(yīng)生成物, 根據(jù)這些反應(yīng)生成物或者反應(yīng)物的變化程度可以進(jìn)行定量或者定性分析。通常采用的儀器分析方法有, 化學(xué)發(fā)光法 、紫外-可見(jiàn)吸收分光光度法 、熒光光度法 、電子自旋探針 以及選擇性電極法等。化學(xué)反應(yīng)法的特點(diǎn)是測(cè)定靈敏度高、廉價(jià)、操作簡(jiǎn)便等。但是, 化學(xué)反應(yīng)法的特異性相對(duì)比較差, 一些氧化還原反應(yīng)或者酶催化反應(yīng)往往對(duì)測(cè)定結(jié)果的判斷產(chǎn)生影響, 一般需要其他分析方法作為比較, 才能獲得滿意的結(jié)論。

2、化學(xué)發(fā)光法
化學(xué)發(fā)光測(cè)定法是儀器分析中靈敏度較高的方法之一, 已在醫(yī)學(xué)、環(huán)境以及工業(yè)分析等許多領(lǐng)域里得到廣泛的應(yīng)用 。活性氧的化學(xué)發(fā)光研究也是活性氧測(cè)定法研究領(lǐng)域中比較活躍的分支之一, 特別是針對(duì)H2O2 測(cè)定, 有許多靈敏度高、選擇性好的化學(xué)發(fā)光體系 。進(jìn)年來(lái), 筆者在H2O2 測(cè)定方面開發(fā)了一系列高靈敏度的化學(xué)發(fā)光分析法。除此之外, 目前比較成功的活性氧化學(xué)發(fā)光測(cè)定法主要有魯米諾法(luminol)、光澤精法(lucigenin)和cypridina luciferin analog(CLA)法。
3、分光光度法
活性氧的分光光度測(cè)定, 常用的方法有細(xì)胞色素丙(cytochrome C)的超氧自由基還原法 和硝基四氮唑籃(nitro blue tetrazolium ,NBT)還原法 。具有氧化活性的細(xì)胞色素C 被·O-2 還原后, 形成了在波長(zhǎng)550 nm 處有強(qiáng)吸收的亞鐵細(xì)胞色素 , 可以用于O-2 的直接測(cè)定, 在SOD 存在下,O-2 受到SOD 的催化形成H2O2 和O2 , 以被開發(fā)為SOD 的間接定量分析法 。 
但是, 活性氧的細(xì)胞色素丙還原法存在著其它還原性物質(zhì), 如HADPA 和還原性酶的干擾, 一般情況下無(wú)法直接用于O-2 的定性分析, 需要比較在SOD 的存在下, 是否還有O-2 與細(xì)胞色素丙發(fā)生反應(yīng)的結(jié)果, 從而判斷O-2 的生成與否。

4、熒光光度法
與化學(xué)發(fā)光一樣, 熒光分光光光度法也是靈敏度高, 操作簡(jiǎn)便的分析方法之一。比較典型的例子是, 二氯熒光素(DCFH)在過(guò)氧化物酶存在下, 被H2O2 或者HO-2 氧化形成具有有螢光的DCF , 可以有效地應(yīng)用于H2O2 定量分析[ 23] 。利用2 , 3-二氨基萘(DAN)與NO-2 在酸性條件下發(fā)生反應(yīng), 形成熒光性的1-(H)-萘三氮茂環(huán), 有人提出用2 , 3-二氨基萘(DAN)作為NO 的測(cè)定方法。