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簡要描述:細胞ROS檢測實驗是達為科生物的基礎服務項目之一,由細胞平臺經(jīng)驗豐富的實驗人員操作完成。
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自由基(free radicals),是指帶不成對電子的原子、分子、離子或原子團。自由基的種類很多,如以氧(O)、碳(C)、氮(N)為中心的活性基團?;钚匝踝?reactive oxygen species, ROS)是生物體內(nèi)一些氧化反應中形成的氧自由基,常見有超氧化陰離子(O2-),過氧化氫(H2O2),過氧化自由基(ROO-)和氫氧自由基(OH-)等形式。自由基外層具有非配對電子,其化學性質(zhì)非常活潑,它既是電子供體,又是電子受體。
活性氧是生命活動中*的活性物質(zhì)。自由基在體內(nèi)可提高一些酶的活性,如核苷酸的合成和肝臟的解毒過程中,自由基可激活某些合成酶或解毒酶。自由基還參與機體內(nèi)一些活性物質(zhì)如前列腺素的合成。炎癥過程中,自由基可促進炎性細胞吞噬細菌和殺死細菌,如中性粒細胞發(fā)生呼吸爆發(fā)時產(chǎn)生大量自由基,可殺死病原體。
ROS更多被賦予明確的病理意義。ROS可對細胞膜結(jié)構、核酸和蛋白分子產(chǎn)生氧化作用,引起其結(jié)構和功能障礙。ROS增多導致機體氧化應激反應(Oxidative Stress)造成細胞損傷,參與多種病理機制。百種以上的疾病狀態(tài)都可能有ROS的參與。
機體通過一系列抗氧化機制,維持ROS的平衡,如超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、過氧化氫酶(Catalase)等酶類和一些小分子還原物質(zhì),可去除細胞生成的ROS。
檢測細胞ROS的含量,可以了解ROS在細胞一些生理和病理狀態(tài)中的變化,分析藥物效應和相關機制。由于ROS在體內(nèi)存在的半衰期很短,僅為15秒左右,需要用敏感的方法對其進行檢測。常用的ROS測定方法包括luminol及其它化合物與氧自由基的化學發(fā)光反應、ROS的電子自旋共振(electron spin resonance, ESR)測定,和自由基反應性熒光染料的測定方法。
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