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簡要描述:蛋白定量實驗是生物學實驗*的一部分。為驗證細胞裂解是否成功,或為了將多個樣品進行平行實驗比較或標準化保存,需對細胞裂解液進行蛋白定量;為了判定蛋白的產(chǎn)量,需對純化好的蛋白進行定量;為了將純化好的蛋白用生物素或者報告酶進行標記,同樣需首先對蛋白樣品進行定量,以保證標記反應在適當?shù)幕瘜W濃度下進行。
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蛋白質(zhì)的定量分析是生物化學和其他生命學科員常涉及的分析內(nèi)容。在生化實驗中,對樣品中的蛋白質(zhì)進行準確可靠的定量分析,是經(jīng)常進行的一項非常重要的工作。蛋白質(zhì)是一種十分重要的生物大分子,它的種類很多,結構不均一,分子量又相差很大,功能各異,這樣就給建立一個理想而又通用的蛋白質(zhì)定量分析的方法帶來了許多具體的因難。
現(xiàn)測定蛋白質(zhì)含量方法有很多。
① 根據(jù)物理性質(zhì):紫外分光光度法
② 根據(jù)化學性質(zhì):凱氏定氮法、雙縮脲法、Folin-酚試劑法(Lowry法)、BCA法、膠體金法。
③ 根據(jù)染色性質(zhì):考馬斯亮藍染色法、銀染法。
④ 根據(jù)其他性質(zhì):熒光法。
蛋白定量分析也就涉及到生產(chǎn)科研的多個領域及行業(yè),也是生物學科、食品檢驗及摻假摻偽、臨床檢驗、診斷疾病和質(zhì)量檢驗中常見的方法。
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